Agarose IgG de souris

Cat. No.: M748148

QUALITÉ & PURETÉ BioReagent, for IP, 50% v/v

Vue d’ensemble

L'agarose IgG de souris d'Aladdin, également connu sous le nom d'agarose IgG de souris normale, d'agarose IgG de souris IP ou de gel d'affinité IgG de souris, est lié de manière covalente à l'IgG de souris non spécifique non marquée de haute qualité. Ce produit est couramment utilisé comme contrôle négatif pour les gels d'agarose d'anticorps dérivés de souris tels que le gel d'affinité Anti-Flag dans les essais d'immunoprécipitation (IP), de co-immunoprécipitation (Co-IP), d'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et d'autres essais liés à l'immunoprécipitation. Par ml de gel décanté, on trouve environ 5 mg d'IgG, ce qui est idéal pour éliminer la liaison non spécifique. Ce produit ne reconnaît en principe aucun antigène. Principaux paramètres de l'agarose IgG de souris

Précautions：

Ce produit contient une petite quantité de conservateur, qui n'affecte pas les essais IP de routine et la purification des protéines. Mais pour les expériences spéciales qui pourraient être perturbées par le conservateur, le gel doit être lavé 3 fois avec des solutions appropriées telles que TBS avant utilisation.Pour les essais d'immunoprécipitation, il est recommandé d'inclure à la fois des contrôles positifs et négatifs. Les échantillons de protéines doivent être purifiés dès que possible après leur collecte et doivent toujours être placés à 4℃ ou sur de la glace pour minimiser la dégradation ou la dénaturation des protéines. La dégradation des protéines peut également être inhibée par l'ajout d'inhibiteurs de protéase appropriés, tels que le Cocktail d'inhibiteurs de protéase à usage général , le Cocktail d'inhibiteurs de protéase et de phosphatase à usage général (MS-safe, 50X) , le Cocktail d'inhibiteurs de protéase pour les extraits de cellules et de tissus de mammifères , le Cocktail d'inhibiteurs de protéase et de phosphatase pour les extraits de cellules et de tissus de mammifères , etc.La capacité de liaison non spécifique de ce produit peut être affectée par des concentrations élevées de DTT, de mercaptoéthanol et de chlorhydrate de guanidine, mais il est applicable au tampon de lyse cellulaire pour Western et IP , au tampon de lyse RIPA et au tampon de lyse NP-40 . Pour les principales caractéristiques et différences des divers tampons de lyse produits par et la sélection des tampons de lyse, veuillez vous référer au site Web à http://www.aladdin-e.com/support/lysis-buffer.htm.If la substance insoluble dans les échantillons de protéines ne peut pas être éliminée complètement par centrifugation, les échantillons peuvent être filtrés avec un filtre de 0,45μm avant d'effectuer l'essai.Ce produit est destiné à la R&D uniquement. Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables pendant l'opération.

Mode d'emploi：

1.Préparation des échantillons de protéinesa.Lyser les cellules ou les tissus avec un tampon de lyse approprié, tel que le tampon de lyse cellulaire 's pour Western et IP . Dans certaines circonstances, le tampon de lyse RIPA fort, le tampon de lyse RIPA moyen ou le tampon de lyse RIPA faible de 's peuvent également être utilisés. D'autres tampons de lyse avec un pH6-8 peuvent également être utilisés.b.Après la lyse et la centrifugation, conserver le surnageant à 4℃ ou sur de la glace pour une utilisation ultérieure. Nous recommandons d'effectuer les procédures suivantes le même jour. Sinon, faire des aliquotes et les conserver à -80℃ pour une utilisation ultérieure.2préparation de l'agarose IgG de sourisL'agarose IgG de souris étant conservé dans une solution protectrice contenant 50 % de glycérol et une petite quantité de conservateur, il doit être lavé correctement avant d'ajouter les échantillons de protéines.a.Remettre doucement en suspension l'agarose IgG de souris, transférer 10-20μl de suspension de gel par 500μl d'échantillon dans un nouveau tube à centrifuger.Remarque : Il est plus facile d'aspirer la suspension de gel à l'aide d'un embout de pipette à large orifice (par ex, en coupant une partie de l'embout avec des ciseaux).b.Ajouter 1X TBS (, ST661/ST665) à un volume final d'environ 0,5ml, et remettre doucement en suspension l'agarose IgG de souris par pipetage ou vortex. Centrifuger à 6000×g pendant 30 secondes à 4℃, retirer soigneusement et jeter le surnageant. Répéter cette étape deux fois.c.Remettre en suspension l'agarose IgG de souris avec 1X TBS égal au volume initial de la suspension du gel (par ex, si 10μl de suspension de gel sont prélevés, ajouter 10μl de TBS 1X).3.Liaison des protéinesd.Ajouter 20μl d'agarose IgG de souris lavé pour 100μl d'échantillon de protéine, bien mélanger et incuber à 4℃ pendant 1 à 2 heures ou toute la nuit en agitant doucement sur un mélangeur rotatif.e.Après incubation, centrifuger à 6000×g pendant 30 secondes à 4℃, et éliminer soigneusement le surnageant.Remarque : Une partie du surnageant peut être réservée dans un tube microfuge propre pour l'examen des résultats de la liaison.f.Remettre doucement en suspension l'agarose IgG de souris dans 500μl de TBS 1X et placer dans un bain de glace sur un agitateur pendant 5 minutes. Centrifuger à 6000×g pendant 30 secondes à 4℃ et éliminer soigneusement le surnageant. Répéter le lavage trois fois, puis conserver l'échantillon sur la glace pour l'élution. 4.ÉlutionEn fonction des caractéristiques de la protéine cible ou des applications en aval, l'une des trois méthodes d'élution suivantes peut être utilisée. Les protocoles suivants sont fournis pour l'élution des protéines cibles à partir du gel d'affinité anti-flag (, P2271). Le contrôle négatif de l'agarose IgG de souris réalisé en parallèle doit être élué de la même manière. 1) Élution compétitive avec le peptide 3X Flag : il s'agit d'une méthode d'élution non dénaturante avec une efficacité d'élution élevée, et les protéines éluées ne contiennent pas les chaînes légères et lourdes de l'anticorps Flag. a. Préparation du tampon d'élution 3X Flag : Dissoudre le peptide 3X Flag (, P9801-25mg) dans un tampon TBS 1X à une concentration finale de 150μg/ml, ou diluer la solution mère 3X Flag à 5mg/ml (, P9801) avec un tampon TBS 1X à une concentration finale de 150μg/ml.b.Pour chaque 20μl de volume de gel initial, ajouter 100μl de tampon d'élution 3X Flag Peptide (150μg/ml). Remettre l'agarose en suspension délicatement et incuber pendant 30 à 60 minutes à température ambiante sur un mélangeur rotatif , ou 1 à 2 heures à 4℃. Pour améliorer l'efficacité de l'élution, augmenter le temps d'incubation ou répéter l'élution. c.Après l'incubation, centrifuger à 6000×g pendant 30 secondes à 4℃, et transférer le surnageant dans un nouveau tube microfuge. Le surnageant contient la protéine marquée d'un drapeau et son complexe protéique.d.Conserver le surnageant à 4℃ pour une utilisation immédiate, ou à -20℃/ -80℃ pour un stockage à long terme.2)Élution acide. Cette méthode est non dénaturante, relativement rapide et efficace. Les protéines éluées conservent également leur activité biologique d'origine, ce qui facilite l'analyse et la détection ultérieures.a.Préparation du tampon d'élution acide (Glycine-HCl 0,1M, pH3,0) et du tampon de neutralisation (Tris-HCl 0,5M, pH7,4, NaCl 1,5M). b.Pour chaque 20μl de volume de gel initial, ajouter 100μl de tampon d'élution acide. Remettre l'agarose en suspension délicatement et incuber pendant 5 minutes à température ambiante sur un mélangeur rotatif.Remarque : Le temps d'incubation ne doit pas dépasser 15 minutes.c.Après incubation, centrifuger à 6000×g pendant 30 secondes à 4℃, et transférer le surnageant dans un nouveau tube microfuge. Ajouter immédiatement 10μl de tampon de neutralisation et bien mélanger. d.Pour obtenir une efficacité d'élution maximale, répéter les étapes b-c et combiner le surnageant contenant la protéine marquée d'un drapeau et son complexe protéique .e.Conserver le surnageant à 4℃ pour une utilisation immédiate, ou à -20℃/-80℃ pour un stockage à long terme. Note 1 : L'efficacité d'élution de la méthode d'élution acide peut être inférieure à celle des deux autres méthodes d'élution.Note 2 : L'efficacité d'élution de la méthode d'élution acide dépend des caractéristiques de la protéine cible. Pour obtenir une efficacité d'élution plus élevée, le pH du tampon d'élution acide peut être optimisé entre 2,5 et 3,1. Le pH ou la quantité de tampon de neutralisation nécessaire pour neutraliser les éluats doit également être ajusté de manière appropriée.3)Elution avec le tampon de chargement 1X SDS-PAGE. Cette méthode est une méthode de dénaturation et les protéines obtenues conviennent à l'électrophorèse SDS-PAGE et à l'analyse Western blot. a.Préparation du tampon de chargement SDS-PAGE : Nous recommandons d'utiliser le tampon de chargement des échantillons SDS-PAGE (2X). Habituellement, le tampon de chargement des protéines SDS-PAGE contient un agent réducteur tel que le DTT, et l'échantillon de protéine élué contiendra la chaîne légère et la chaîne lourde de l'anticorps Flag.b.Pour chaque 20μl de volume de gel initial, ajouter 20μl de tampon de chargement d'échantillon SDS-PAGE 2X, bien mélanger et chauffer à 95℃ pendant 5 minutes. c.Centrifuger à 6000×g ou 4℃ pendant 30 secondes. Prendre le surnageant pour l'électrophorèse SDS-PAGE ou l'analyse Western blot.Note : L'agarose ne peut pas être réutilisé car le SDS dans le tampon de chargement détruit les anticorps Flag.FAQ : Problème Causes possibles Solution Une grande quantité de protéines marquées se trouve dans le flux. Le temps de fixation n'est pas suffisant. Si vous utilisez la méthode par lots, augmentez le temps de liaison de manière expérimentale ; si vous utilisez la méthode par colonne, utilisez un débit plus faible lors du chargement des échantillons. La colonne est surchargée. Réduire la quantité d'échantillon ajoutée au gel ou augmenter la quantité de gel. L'étiquette n'est pas accessible au gel. Exposer le tag épitope en ajoutant une faible quantité de dénaturant à l'extrait de protéine (une dialyse peut être nécessaire avant l'application sur le gel), ou fusionner le tag à l'autre extrémité de la protéine cible. Le gel n'a pas été régénéré depuis la dernière purification. Effectuer la procédure de régénération du gel avant la fixation. Problème de compatibilité des réactifs. Dialysez l'échantillon avec du TBS avant la procédure de purification. La protéine cible a été dégradée. 1. Préparer des lysats frais. Éviter d'utiliser des lysats congelés. 2. Effectuer la purification à une température plus basse, telle que 4℃. 3. Utiliser des inhibiteurs de protéase appropriés dans le lysat ou augmenter leurs concentrations pour empêcher la dégradation de la protéine de fusion. Il y a très peu ou pas de protéine marquée dans l'éluat. La protéine n'est pas complètement éluée. Changer de méthode d'élution. Aucune protéine cible n'est exprimée. S'assurer que la protéine d'intérêt contient le tag par des analyses Western blot ou dot blot. Niveau d'expression de la protéine très faible. 1. Utiliser un plus grand volume de lysat cellulaire. 2. Optimiser les conditions d'expression pour augmenter le niveau d'expression de la protéine. Les lavages sont trop rigoureux. 1. Réduire le nombre de lavages. 2. Éviter d'ajouter de fortes concentrations de NaCl au mélange. 3. Utiliser des solutions contenant moins ou pas de détergent. Les temps d'incubation sont insuffisants. Augmenter les temps d'incubation avec le gel d'affinité (de quelques heures à une nuit). Une substance interférente est présente dans l'échantillon. 1. Les lysats contenant de fortes concentrations de DTT, de 2-mercaptoéthanol ou d'autres agents réducteurs peuvent détruire la fonction de l'anticorps et doivent être évités. 2. Des concentrations excessives de détergent peuvent interférer avec l'interaction anticorps-antigène. Les niveaux de détergent dans les tampons peuvent être réduits par dilution. Le système de détection est inadéquat. Si la détection par Western blot est utilisée : 1. Vérifier les anticorps primaires et secondaires en utilisant les contrôles appropriés pour confirmer la liaison et la réactivité. 2. Vérifier que le transfert est adéquat en colorant la membrane avec du Ponceau S. 3. Utiliser un nouveau substrat de détection ou essayer un autre système de détection. Plusieurs bandes de protéines sont présentes dans l'éluat. La protéine n'est pas stable à température ambiante. Purifier la protéine cible à une température plus basse, telle que 4℃. Dégradation de la protéine due à l'activité des protéases pendant le processus de purification. Ajouter des inhibiteurs de protéase au lysat cellulaire. Liaison non spécifique. 1. Préparer à nouveau le lysat cellulaire. 2. Ajouter des étapes de lavage supplémentaires. L'arrière-plan est trop élevé. Les protéines se lient de manière non spécifique à l'anticorps monoclonal, aux billes de gel ou aux tubes de microcentrifugation. 1. Pré-nettoyer le lysat avec de l'agarose IgG de souris ou de l'agarose IgG de lapin pour éliminer les protéines qui se lient de façon non spécifique. 2. Après avoir suspendu les billes pour le lavage final, transférer la totalité de l'échantillon dans un tube de microcentrifugation propre avant la centrifugation. Les lavages sont insuffisants. 1. Augmenter le nombre de lavages. 2. Prolonger la durée des lavages, en incubant chaque lavage pendant au moins 15 minutes. 3. Augmenter les concentrations de sel et/ou de détergent dans les solutions de lavage. 4. Centrifuger à vitesse réduite pour éviter le piégeage non spécifique des protéines dénaturées du lysat lors de la centrifugation initiale des complexes de gel d'affinité.

Spécifications

Product Name

Agarose IgG de souris

Synonymes

Mouse IgG Affinity Gel | Mouse IgG Affinity Agarose | Mouse IgG agarose gel | Mouse IgG IP Agarose

Grade

BioReagent, for IP

Spécifications et pureté

BioReagent,for IP,50% v/v

Note

Aladdin's official website currently offers M748148-1ml and M748148-5ml products

Type de molécule

Bioreagents/Buffer

Product Line

Produits biologiques

Stockage et expédition

Concentration

50% v/v

Conditions de stockage de stockage

Conserver à -20°C

Expédié en

Glacière + blocs de glace

Stabilité et stockage

Conserver à -20℃ jusqu'à 1 an.

Images

IP: UltraBio™ Mouse IgG Agarose (M748148)

UltraBio™ Mouse IgG Agarose (M748148) - IP 

All lanes: Recombinant DYKDDDDK tag (Binds to Flag tag) Antibody (Ab210603) at 1/2000 dilution 

Lane 1: HEK-293 stably transfected with a P2A-bicistronic vector co-expressing Puromycin Resistance gene and an 11-tag fusion protein (Flag, HA, Myc, S-Tag, GST, His, V5, VSV-G, Strep Tag II, SUMO and EGFP) whole cell lysate 20μg. 

Lane 2: UltraBio™ Anti-DYKDDDDK Agarose (U1508188) IP in HEK-293 stably transfected with a P2A-bicistronic vector co-expressing Puromycin Resistance gene and an 11-tag fusion protein (Flag, HA, Myc, S-Tag, GST, His, V5, VSV-G, Strep Tag II, SUMO and EGFP) whole cell lysate. 

Lane 3: UltraBio™ Mouse IgG Agarose (M748148) IP in HEK-293 stably transfected with a P2A-bicistronic vector co-expressing Puromycin Resistance gene and an 11-tag fusion protein (Flag, HA, Myc, S-Tag, GST, His, V5, VSV-G, Strep Tag II, SUMO and EGFP) whole cell lysate. 

Secondary: Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP) (Ab179001) at 1/20000 dilution 

Predicted band size: 115 kDa 

Observed band size: 64, 117 kDa 

Exposure time: 5.0 s 

Application Protocols

Tested applications, recommended bead volumes, incubation times, and positive controls are not specified for this item. Refer to the CoA/Spec Sheet or product SDS for any available method notes.

Because no item-specific protocols are provided, please consult the Reaction Conditions tab for general literature-based guidance on equilibration, binding, washing, and elution for immunoprecipitation and pull-down workflows. Validate parameters empirically for your sample type and detection method.

Biological Roles

Background on the biological ligand (general, literature):

• Mouse Immunoglobulin G (IgG): A major class of antibody in mice, composed of two heavy and two light chains forming a Y-shaped molecule. Key regions:
  • Fab regions bind antigens with high specificity.
  • Fc region engages Fc receptors and complement, mediating effector functions such as opsonization and ADCC.
• Isotypes/subclasses: Mouse IgG commonly includes subclasses (e.g., IgG1, IgG2a/c, IgG2b, IgG3), which differ in Fc-receptor interactions and effector profiles. The specific subclass composition of the immobilized IgG in this product is not specified.
• Relevance to IP controls: Mouse IgG provides a matched isotype framework to replicate nonspecific interactions attributable to antibody constant regions and the agarose matrix, enabling accurate background subtraction in proteomic and immunochemical workflows.
• Protein–protein interactions: Numerous cellular and microbial proteins bind to IgG Fc or Fab regions. The immobilized IgG can thus act as a capture reagent for such interactors under appropriate buffer conditions (method-development context).

Note: The above biological roles describe native mouse IgG in general. They are included to contextualize how an immobilized Mouse IgG ligand functions in research assays. No clinical or diagnostic claims are made for this product.

Buffer Applications

This resin is used with aqueous buffers typical for immunoprecipitation and pull-down workflows rather than as a buffer component itself.

General buffer guidance (literature):

• Equilibration and binding: Phosphate-buffered saline (PBS) or Tris-buffered saline (TBS), pH ~7–8. Include 0.05–0.2% nonionic detergent (e.g., Tween 20, NP-40) and 150 mM NaCl to reduce nonspecific binding as needed.
• Lysis buffers: For cell/tissue lysates, RIPA or mild nonionic detergent buffers may be used if they preserve the interactions under study. Validate detergent and salt concentrations to balance stringency and retention of complexes.
• Wash buffers: Same as binding buffer, optionally increased salt (e.g., 300–500 mM NaCl) or mild detergent to reduce background (optimize empirically).
• Elution: Low-pH glycine buffer (e.g., pH ~2–3) or high-salt/chaotropic conditions; immediately neutralize acidic eluates to protect proteins.
• Protease/phosphatase inhibitors: Add fresh to lysis and binding buffers to preserve post-translational states where relevant.

Item-specific buffer composition, pH limits, and preservative content are not specified for this item; consult CoA/Spec Sheet. Always confirm compatibility of your buffer system with the immobilized Mouse IgG and agarose matrix.

Green Alternatives

This product is an aqueous, reusable solid-phase affinity resin and does not have a direct “green solvent” alternative. Sustainability considerations (general):

• Resource efficiency:
  • Reusability: Affinity resins can often be reused across multiple cycles if fouling and microbial contamination are controlled (validate with your target and assay). Reuse reduces material consumption and waste.
  • Aqueous operation: Processes are run in water-based buffers, minimizing organic solvent use.
• Waste minimization:
  • Avoid excessive single-use plastics by employing reusable gravity columns or spin devices where appropriate.
  • Consolidate wash steps and optimize buffer volumes to reduce aqueous waste.
• Safety and environmental notes:
  • If the slurry contains preservatives (e.g., azide), collect waste appropriately; do not discharge to drains unless permitted. Preservatives for this item are not specified—consult CoA/SDS.
• Alternatives in concept (general):
  • For isotype control IPs, laboratories may alternatively use isotype control antibodies with a separate unconjugated agarose support; however, a pre-conjugated Mouse IgG–Agarose minimizes coupling chemistry, reduces chemical waste, and improves reproducibility.

Overall, choosing a ready-to-use, water-based affinity resin aligns with green chemistry principles by limiting hazardous reagents and enabling potential reuse.

Pharmaceutical Uses

This product is designated For research use only and is not intended for human or veterinary use, diagnostic procedures, or GMP manufacturing (Product Data).

Contextual information (general, literature):

• Agarose-based affinity media are widely used in bioprocess development and manufacturing for protein capture and polishing; however, such applications require GMP-grade resins with detailed regulatory documentation and validated cleaning/sanitization protocols.
• Mouse IgG–Agarose in research settings primarily serves as a control matrix for immunoprecipitation and assay development, rather than as a process-scale capture medium.

For any translational or manufacturing intent, select resins with appropriate pharmacopeial status, extractables/leachables characterization, and regulatory support files. Such attributes are not specified for this item.

Physical Properties

• Physical state: Aqueous bead slurry (typical for agarose resins; item-specific appearance not specified)
• Appearance: Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet.
• Composition details (bead % slurry, preservative, buffer): Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet.
• Particle size / porosity: Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet. (Typical agarose resins are tens to hundreds of micrometers in diameter; literature)
• Density/settling: Agarose beads are slightly denser than water and rapidly settle by gravity (literature, general).
• pH stability: Broadly compatible with neutral buffered aqueous systems used in IP (e.g., PBS/TBS; general, literature). Exact pH and chemical stability limits are not specified for this item.
• Temperature sensitivity: Store at 2–8°C; do not freeze (Product Data). Freezing can crack beads and denature the protein ligand (general).
• Solubility: Insoluble solid phase; beads suspended in water/buffer (general).
• Viscosity of slurry/RI/UV cutoff: Not applicable/not specified for this item.

Notes for use (general, literature):

• Equilibrate in the chosen binding buffer prior to loading lysate to minimize dilution and maintain ionic strength.
• Avoid strong organic solvents, extremes of pH, oxidants, and chaotropes that can damage IgG or agarose unless validated for this specific resin (item-specific compatibility not provided).

Quality and Grades

• Grade/Purity: BioReagent, for IP (Product Data).
  • Meaning (general): Suitable for immunoprecipitation workflows where background binding and matrix integrity are critical. Typically indicates low particulate contaminants, appropriate buffer quality, and reproducible performance in IP (general description; item-specific QC metrics not provided).
• Intended use: For research use only (Product Data). Not for human or veterinary use, diagnostic procedures, or GMP manufacturing.
• Item-specific QC attributes: Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet.
• Stabilizers/preservatives: Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet. Presence/absence of sodium azide or other biocides affects compatibility with certain downstream assays and enzymes (general note).
• Performance considerations (general, literature):
  • Low nonspecific binding of the bead surface and ligand is essential for clean IP controls.
  • Consistent coupling density and intact IgG orientation help ensure predictable capture of proteins that interact with mouse IgG (e.g., Fc-binding proteins) and enable use as an isotype control matrix.
• Documentation: For batch-specific details (binding capacity, ligand load, buffer, preservative, microbial limits), consult the CoA/Specification Sheet.

Reaction and Applications

As an immobilized Mouse IgG–Agarose affinity matrix, this product supports protein capture and immunoassay workflows rather than chemical reactions.

Representative research applications (general, literature):

• Immunoprecipitation (IP) controls: Use as an isotype/negative control matrix when the experimental IP employs a mouse monoclonal antibody. Parallel capture with Mouse IgG–Agarose reveals nonspecific interactions with the matrix and IgG backbone.
• Pre-clearing lysates: Incubate clarified cell/tissue lysates with the resin to remove proteins that bind nonspecifically to mouse IgG or agarose before the primary IP with a specific antibody.
• Removal/capture of Fc-binding proteins: Enrich or deplete bacterial or eukaryotic proteins that interact with mouse IgG Fc domains (e.g., Protein A/G/L-binding assessments) in method development.
• Immunoassay development: Evaluate background signals in pull-down/MS workflows by processing a Mouse IgG control in parallel with the specific antibody pull-down.

Practical tips (general):

• Gently invert to resuspend; avoid vigorous vortexing that can foam or shear beads.
• Equilibrate resin in the chosen binding buffer; pre-block with irrelevant protein (e.g., BSA) if high background is observed (optimize empirically).
• Maintain cold conditions (2–8°C or on ice) during binding to preserve complexes; wash with buffer containing moderate salt and mild nonionic detergent to reduce nonspecific binding.
• Elution strategies include low-pH glycine, high-salt, or competitive eluents; immediately neutralize acidic eluates to protect proteins (general guidance).

Reaction Conditions

Binding and elution parameters for affinity capture (general, literature guidance; item-specific conditions are not specified and should be optimized empirically):

• Sample preparation: Clarify lysates by centrifugation and/or filtration to prevent bead fouling.
• Resin preparation: Gently resuspend; transfer the desired bed volume; wash/equilibrate 3–5 resin volumes with binding buffer.
• Binding:
  • Temperature: 2–8°C or room temperature as compatible with target stability; cold conditions often preserve labile complexes.
  • Time: 30–120 min end-over-end or gentle rocking; longer incubations may increase yield but can raise background.
  • Buffer: PBS or TBS at neutral pH; include 0.05–0.2% nonionic detergent and 150 mM salt to reduce nonspecific binding as needed.
• Washing: 5–10 resin volumes of binding buffer; increase salt (e.g., 300–500 mM) or add mild detergent for higher stringency.
• Elution options:
  • Low-pH glycine (pH ~2–3), rapid collection, immediate neutralization.
  • High salt or chaotropic modifiers for specific interactions (ensure compatibility with downstream analyses).
  • SDS sample buffer for direct SDS-PAGE (denaturing; not compatible with native downstream assays).
• Regeneration/reuse: Rinse thoroughly with binding buffer after elution; short exposures to low-pH eluent followed by neutralization may be acceptable. Validation is required to confirm capacity retention. Detailed reuse limits are not specified for this item.

Always confirm conditions with small-scale trials before scaling up.

Safety and Handling

• GHS classification, signal word, pictograms, H-statements: Not specified for this item; consult the product SDS for authoritative safety information.
• Anticipated hazards (general for protein/agarose resins): Typically non-volatile and low acute hazard, but may contain buffer components or preservatives that require caution. Avoid ingestion, inhalation of dried particles, and contact with eyes/skin. Handle as a biological reagent using good laboratory practice.
• Storage conditions: Store at 2–8°C. Do not freeze. (Product Data). Shipment: Wet ice; do not freeze. (Product Data)
• Incompatibilities (general, literature): Avoid strong acids/bases, oxidizers, and organic solvents that can degrade agarose or denature the immobilized IgG. Prevent microbial contamination; keep container closed when not in use.
• PPE: Laboratory coat, nitrile gloves, and safety glasses. Use eye/face protection if splashing is possible. Work in a clean area to prevent contamination of the resin.
• First aid (general): If on skin/eyes, rinse with water. If inhaled (e.g., dried particulate), move to fresh air. If ingested, rinse mouth. Seek medical attention as needed. Provide SDS to responders.
• Spill response: Contain and absorb aqueous slurry with inert material; collect resin for disposal per institutional and local regulations.
• Waste: Dispose according to local/regional regulations for laboratory biological/chemical waste. Do not discharge preservatives or buffers to drains unless permitted.

Always defer to the SDS and institutional EHS policies for definitive guidance.

Solvent Selection

This product is an aqueous bead slurry and is not used as a solvent. For method development:

• Compatible media (general, literature): Aqueous buffers such as PBS or TBS for equilibration, binding, and washing. Detergent-containing lysis buffers (e.g., NP-40, Triton X-100) may be used as appropriate for IP workflows provided the protein–ligand interaction is maintained; item-specific compatibility is not provided.
• Avoid: Organic solvents, strong acids/bases, and chaotropes that can damage agarose or denature immobilized IgG unless validated for this resin.
• Selection guidance: Choose buffer ionic strength and pH to preserve protein–protein interactions relevant to your IP. Include mild detergents/salts to minimize nonspecific adsorption while retaining target binding (general).

For detailed compatibility and tolerance limits, refer to the CoA/Spec Sheet and validate in small-scale tests.

Storage and Reconstitution

• Storage: Store at 2–8°C. Do not freeze. (Product Data)
• Shipping: Shipped on wet ice. Do not freeze. (Product Data)
• Reconstitution: Not applicable; supplied as an aqueous slurry. If the resin settles during storage, gently invert to resuspend before use. Do not vortex aggressively to avoid bead damage (general).
• Buffer/preservative content: Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet. If a preservative is present, minimize exposure and dispose of waste appropriately.
• Handling tips (general):
  • Keep container tightly closed to prevent evaporation and contamination.
  • Work aseptically when accessing the bottle to prolong shelf life and reduce microbial growth.
  • Rinse the cap and container threads with buffer after dispensing to avoid salt crystallization.
• Freeze–thaw guidance: Do not freeze; freezing can fracture agarose beads and may denature immobilized IgG, resulting in loss of capacity (general).

For shelf life and reuse guidance, consult the batch-specific CoA/Spec Sheet. Always follow institutional biosafety procedures when handling protein-bearing resins.

Structure and Identity

UltraBio™ Mouse IgG Agarose is an affinity chromatography medium comprising mouse immunoglobulin G (IgG) immobilized on an agarose bead support. It is supplied for research workflows such as immunoprecipitation (IP) and related immunocapture steps.

• SKU: M748148
• Product type: Immobilized protein–polysaccharide affinity resin (mouse IgG ligand on agarose)
• Functional features:
  • Ligand: Mouse IgG (polyclonal or isotype control antibody; exact isotype/subclass and source not specified for this item)
  • Support: Crosslinked agarose matrix (typical for low backpressure gravity/centrifuge IP workflows; general information)
  • Coupling: Covalent linkage to agarose (general for stability in common IP buffers; specific chemistry not specified for this item)
• Molecular formula: Not applicable to this composite material
• Molecular weight: Not applicable to this composite material
• SMILES: Not applicable
• InChIKey: Not applicable

2D/structural description (general):

• Agarose matrix: a neutral, linear polysaccharide composed of repeating agarobiose units that form porous hydrogel beads (general).
• Mouse IgG: a Y-shaped glycoprotein (~150 kDa, general) featuring two heavy and two light chains with Fc and Fab regions; immobilization typically presents Fc/Fab domains for interaction with binding partners (general).

Item-specific identifiers (CAS, CID, structural keys): Not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet.

Synthetic Utility

Not typically applicable. UltraBio™ Mouse IgG Agarose is a bioaffinity resin for protein capture and immunoprecipitation controls, not a reagent for organic synthesis or small-molecule transformations.

For researchers seeking solid supports for chemical synthesis or scavenging in organic media, consider polymer-supported reagents specifically engineered for solvent compatibility and chemical resilience (general). This agarose-based, protein-functionalized matrix is intended for aqueous, biomolecular workflows.

Target Specificity

Item-specific details such as antigen specificity, clone, isotype/subclass, and species reactivity are not provided for this product. UltraBio™ Mouse IgG Agarose is described as an agarose resin bearing mouse IgG; it is not positioned as an antibody targeting a defined antigen.

• Antigen/epitope: Not applicable/not specified for this item; refer to CoA/Spec Sheet.
• Clone/isotype: Not specified for this item.
• Species reactivity: Not specified for this item.

For experiments requiring defined antigen specificity or subclass, use a characterized monoclonal antibody immobilized on a solid phase or an "anti-mouse IgG" capture resin as appropriate to your assay design.