Determine the necessary mass, volume, or concentration for preparing a solution.
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O EnzymoPure™ Express Enzyme da Aladdin é uma solução de dissociação celular sem origem animal (AOF) e pronta a usar que contém uma tripsina recombinante estável à temperatura ambiente. Este produto digere as células de forma ligeira, rápida e eficaz, quase sem danos para as células, e pode ser um substituto perfeito para a solução de digestão celular de tripsina comum.
Este produto é esterilizado por filtração e contém aproximadamente 1mM EDTA, com um valor de pH de 7,2-7,8. Não só pode ser utilizado diretamente para digerir células de cultura ou alguns tecidos, como também é mais adequado para a digestão de células ou tecidos que exigem rigorosamente a ausência de origem animal.
A tripsina é uma serina protease que cliva especificamente as ligações peptídicas no lado carboxílico dos resíduos de lisina ou arginina. A EnzymoPure™ Express Enzyme da Aladdin emprega uma enzima recombinante de alta pureza semelhante à tripsina, também conhecida como substituto da tripsina, com uma sequência de proteínas derivadas de fungos e as mesmas propriedades enzimáticas que a tripsina derivada da suína, mas com maior estabilidade, melhor pureza, digestão mais suave e menor citotoxicidade, que pode ser usada como substituto da tripsina derivada do pâncreas suíno para dissociação de células e tecidos e outras aplicações.
O substituto da tripsina neste produto não é de origem animal. Este produto está isento de contaminação viral de origem animal, bem como de outras impurezas de origem animal. Tanto as quantidades de proteína hospedeira como de resíduos de ADN neste produto cumprem as normas da farmacopeia.
Este produto tem um bom efeito de digestão. Sob as mesmas condições, a atividade enzimática deste produto é aproximadamente 2 vezes superior à da solução de digestão celular comum contendo 0,05% de tripsina, e é mais eficaz para a maioria dos tipos de células. Normalmente, a maioria das células aderentes pode ser digerida em 1-3 minutos à temperatura ambiente. Consulte a Figura 1 para ver o efeito de digestão celular deste produto. Normalmente, as células podem ser removidas quando se verifica uma ligeira alteração morfológica visível e antes de as células estarem completamente arredondadas.

Figura 1. Digestão de células A498, BEAS-2B e L929 com a EnzymoPure™ Express Enzyme da Aladdin. Nesta experiência, este produto colocado à temperatura ambiente durante cerca de 10 minutos foi diretamente adicionado às células após a aspiração do meio de cultura celular. Em 1-2 minutos, as células tratadas demonstraram bordos contraídos e dissociaram-se gradualmente em células individuais. As fotografias foram tiradas após diferentes períodos de tempo, conforme indicado. O efeito da digestão será melhor se as células forem lavadas com PBS ou HBSS antes da digestão. Esta figura serve apenas de referência, podendo variar consoante as diferentes condições experimentais.
Este produto utiliza um substituto de tripsina recombinante de elevada pureza que possui uma elevada atividade enzimática específica, reduzindo o risco de danos celulares causados por outras enzimas. Pode minimizar os danos celulares causados pela sobre-digestão (Figura 2), eliminando a necessidade de inibidores enzimáticos ou soro para terminar a reação.

Figura 2. Estado de crescimento das células digeridas com a EnzymoPure™ Express Enzyme da Aladdin. As células A498 e BEAS-2B foram digeridas com EnzymoPure™ Express Enzyme, respetivamente. As células foram digeridas em excesso até ficarem todas a flutuar e não foi utilizado qualquer inibidor de tripsina para terminar a reação. As células excessivamente digeridas foram recolhidas por centrifugação e cultivadas durante 18 horas após a replantação. Não foram observadas diferenças significativas entre as células sobredigeridas EnzymoPure™ e as células digeridas normais. Esta figura é apenas para referência, que pode variar devido a diferentes condições experimentais.
Precauções:
Embora este produto seja muito estável à temperatura ambiente, ainda recomendamos armazená-lo a 4 ℃. Se armazenado à temperatura ambiente, deve ser mantido no escuro. A temperatura ambiente deve estar dentro de uma faixa apropriada e o armazenamento prolongado em temperatura ambiente acima de 30 ℃ deve ser evitado.
Este produto pode ser usado diretamente para digestão celular após a remoção de 4 ℃. Para células que são mais difíceis de digerir ou onde a digestão rápida é necessária, a digestão pode ser realizada a 37 ℃ por 1-3 minutos.
Devem ser tomadas precauções especiais para evitar a contaminação microbiana deste produto.
Este produto pode ser armazenado a -20 ℃ para armazenamento a longo prazo. Evite congelamento e descongelamento repetidos.
Este produto é apenas para P&D. Não para medicamentos, uso doméstico ou outros usos.
Para sua segurança e saúde, use uma bata de laboratório e luvas descartáveis durante a operação.
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