Tampão de bloqueio UltraBio™ (10X)

Cat. No.: B751615

Visão geral

O tampão de bloqueio UltraBio™ da Aladdin é uma nova geração de tampão de bloqueio rápido e altamente eficaz. O seu efeito global é significativamente melhor do que o dos tampões de bloqueio tradicionais baseados em BSA (albumina de soro bovino), leite em pó desnatado, caseína e semelhantes, bem como produtos semelhantes provenientes do estrangeiro. Pode ser utilizado para o bloqueio em Western blot (WB), imunofluorescência (IF), imunohistoquímica (IHC), imunocitoquímica (IC) e outras experiências, diluição de anticorpos primários ou secundários. Este produto é uma solução 10 vezes concentrada (10X) que não contém detergente. A solução de bloqueio UltraBio™ é rápida e eficiente. O tempo de bloqueio é normalmente de apenas 5-15 minutos e, em comparação com as soluções de bloqueio tradicionais, tais como BSA, leite em pó desnatado, caseína e soluções de bloqueio rápido semelhantes do estrangeiro, apresenta uma relação sinal-ruído mais forte (ver Figura 1). A solução de bloqueio UltraBio™ tem um fundo muito baixo após o bloqueio. A solução de bloqueio não contém soro ou albumina, garantindo uma relação sinal-ruído extremamente elevada. A solução de bloqueio UltraBio™ é compatível com peroxidase de rábano (HRP), fosfatase alcalina e anticorpos secundários marcados com biotina. Este produto contém um conservante que não afecta a atividade da HRP e da AP, e não interfere com a deteção de anticorpos secundários marcados com HRP ou AP. Também não contém biotina, o que não interfere com a deteção baseada em biotina. A Solução de Bloqueio UltraBio™ (10X) é flexível de utilizar. Este produto é uma solução 10X que pode ser diluída para 1X com PBS, TBS ou outra solução apropriada de acordo com as necessidades experimentais e depois utilizada em experiências relacionadas. Também pode ser utilizado para o bloqueio, diluição do anticorpo primário ou do anticorpo secundário, adicionando Tween-20 ou Triton X-100 a uma concentração final de 0,05%-0,1%, de acordo com as necessidades experimentais. O efeito de bloqueio deste produto em comparação com BSA e produtos estrangeiros semelhantes é apresentado na Figura 1. Sob a mesma amostra e condições experimentais, apenas quando existem diferenças na solução de bloqueio e no tempo de bloqueio, como se mostra na figura abaixo, o fundo geral após o bloqueio com a solução de bloqueio UltraBio™ da Aladdin é significativamente inferior ao que se verifica após o bloqueio com BSA, e o brilho da banda alvo é significativamente superior ao de marcas estrangeiras semelhantes. Figura 1. Comparação do efeito de bloqueio da solução de bloqueio UltraBio™ com BSA e produtos estrangeiros semelhantes. Da esquerda para a direita em cada grupo de experiências: 5 μl de marcador de proteína, 2,5 μg de quantidade de proteína do lisado de células HeLa, 5 μg de quantidade de proteína do lisado de células HeLa. Tenha em atenção que, para o Anticorpo A, a solução de bloqueio UltraBio™ tem um fundo mais baixo do que o BSA e produtos estranhos semelhantes, e o sinal é significativamente mais forte do que produtos estranhos semelhantes. Para o Anticorpo B, o Tampão de Bloqueio UltraBio™ tem um fundo inferior ao da BSA e um sinal significativamente mais forte do que o de produtos estrangeiros semelhantes. Os resultados experimentais reais podem variar devido a diferenças nas amostras, anticorpos, condições experimentais, etc. Os dados apresentados na figura servem apenas de referência. Para uma comparação e seleção de diferentes soluções de bloqueio, consultar a página Web relevante da Aladdin: http://www.aladdin-e.com/. Com base no cálculo de que são necessários 5-10 ml de solução de bloqueio UltraBio™ (1X) para bloquear cada membrana, uma embalagem deste produto pode bloquear 100-200 membranas.

Nota:

Este produto é recomendado apenas para uma única utilização. A reutilização pode resultar numa diminuição da eficiência do bloqueio. No entanto, para alguns anticorpos primários com um elevado rácio sinal/ruído, como alguns anticorpos de referência interna, esta solução de bloqueio pode ser reutilizada 2-3 vezes. Não misturar a solução de bloqueio recuperada com a solução de bloqueio não utilizada. Normalmente, este produto é utilizado para membranas PVDF e membranas NC com um tempo de bloqueio de 5-15 minutos. No caso de alguns anticorpos com fundos muito elevados, pode tentar prolongar o tempo de bloqueio para 30-60 minutos. Além disso, se houver uma necessidade especial, não há qualquer problema em bloquear durante a noite a 4 °C. Uma vez que nenhuma solução de bloqueio é adequada para todos os sistemas experimentais, para algumas experiências especiais, pode ser necessário considerar a utilização de outras soluções de bloqueio mais adequadas com base em circunstâncias específicas. Utilizar uma pinça de ponta plana para pegar e colocar a membrana de PVDF e a membrana NC, e apenas os bordos devem ser suavemente fixados. Durante a operação, devem ser evitados arranhões, vincos ou reentrâncias na superfície da membrana. Uma vez molhada e activada, a membrana de PVDF deve ser mantida sempre molhada. De acordo com os passos específicos da Western, pode ser colocada numa solução apropriada, como uma solução de transferência Western ou uma solução de lavagem. Caso contrário, pode gerar-se um fundo anormal que é difícil de selar. No caso de um fundo elevado, para melhorar ainda mais a relação sinal/ruído, este produto pode ser diluído para 1X e, em seguida, pode ser adicionado Tween-20 ou Triton X-100 até uma concentração final de 0,05%-0,1%. Este produto destina-se apenas a utilização profissional em investigação científica e não se destina a diagnóstico ou tratamento clínico, nem a utilização em alimentos ou medicamentos. Para sua segurança e saúde, utilize vestuário de laboratório e luvas descartáveis durante o manuseamento.

Instruções de utilização:

1. Diluição do Tampão de Bloqueio UltraBio™ (10X) Diluir o Tampão de Bloqueio UltraBio™ (10X) para 1X com PBS, TBS ou PBS ou TBS contendo 0,05%-0,1% de Tween-20 ou Triton X-100 de acordo com as necessidades da experiência.

2. Bloqueio de membranas em Western Blot

a. Após a conclusão da transferência, lavar a membrana proteica com a solução de lavagem Western durante 1-2 minutos.

b. Dependendo do tamanho da membrana, verta um determinado volume de solução de bloqueio UltraBio™ (1X) para uma placa de Petri ou outro recipiente adequado para garantir que a solução de bloqueio possa cobrir totalmente a membrana mais tarde. Para uma western convencional, recomenda-se a utilização de cerca de 10 ml de solução de bloqueio para uma membrana com cerca de 6,6 × 8,5 cm.

c. Utilizar uma pinça de ponta plana para segurar um dos cantos da membrana, colocar a membrana na solução de bloqueio UltraBio™ (1X), submergir completamente a membrana na solução e colocá-la num agitador horizontal para bloquear durante cerca de 10 minutos (normalmente 5-15 minutos é suficiente; os testes com múltiplos anticorpos mostraram que o efeito de 10 minutos de bloqueio é muitas vezes significativamente melhor do que o efeito do bloqueio convencional de 1 hora com BSA).

d. A membrana bloqueada pode então ser utilizada para experiências subsequentes, como a incubação de anticorpos primários.

3. Para IF, IHC e outras experiências, basta seguir os procedimentos experimentais relevantes e substituir diretamente a solução de bloqueio tradicional pela solução de bloqueio UltraBio™ (1X). O tempo de bloqueio geral pode ser encurtado para 10 minutos (entre os múltiplos anticorpos primários testados pela Aladdin, não há diferença significativa no efeito do bloqueio durante 10-20 minutos, e o efeito do bloqueio durante 10 minutos é equivalente ou significativamente melhor do que o método de bloqueio convencional).

Specifications

Product Name

Tampão de bloqueio UltraBio™ (10X)

Tipo de molécula

Bioreagentes/Tampão

Product Line

biological_products

Armazenamento e envio

Condições de armazenamento de armazenamento

Armazenar a 2-8°C

Enviado em

Gelo húmido

Estabilidade e armazenamento

Armazenar a 4 ℃ por até 1 ano, ou -20 ℃ para armazenamento a longo prazo. A diluição 1X deve ser mantida a 4 ℃ e usá-la dentro de 1 mês.

Perguntas frequentes

What documentation is provided?

Available product documentation, including Certificates of Analysis (COA), Safety Data Sheets (SDS), and specification sheets, is shown in the product document area. Document availability and access follow the current site policy.