O Tampão de Bloqueio UltraBio™ geralmente não é reutilizável. Mas para alguns anticorpos primários com elevado rácio sinal/ruído, como anticorpos primários contra proteínas de referência internas, este produto pode ser reutilizado 2-3 vezes. Não misturar as soluções de bloqueio recuperadas com as não utilizadas. Normalmente, são necessários 5-15 minutos para bloquear as membranas PVDF ou NC. Como nenhum reagente de bloqueio é ideal para todos os sistemas experimentais, deve ser selecionado um tampão de bloqueio adequado com base nos requisitos especiais da sua experiência.Utilizar uma pinça de ponta plana para manusear suavemente as membranas PVDF e NC nos cantos ou bordos, de modo a evitar arranhões, vincos ou reentrâncias na superfície da membrana. A membrana PVDF, uma vez infiltrada e activada, deve ser mantida húmida, colocando-a no tampão de transferência Western ou no tampão de lavagem, de acordo com os procedimentos Western Blot. Caso contrário, pode produzir-se um fundo anormal que é difícil de bloquear. Para sua segurança e saúde, por favor use uma bata de laboratório e luvas descartáveis durante a operação.
Instruções de utilização：
1. Procedimento para bloqueio de membranasa. Depois de completar a transferência de proteínas, lavar a membrana com tampão de lavagem Western durante 1-2 minutos.b. Com base no tamanho da membrana, adicionar um volume suficiente de UltraBio™ Blocking Buffer (PBSTx) numa placa de Petri ou outro recipiente apropriado. Para Western Blot normal, utilizar 10 ml de Tampão de Bloqueio para uma membrana de 6,6×8,5 cm. c. Fixar um canto da membrana com uma pinça de ponta plana e colocar a membrana no Tampão de Bloqueio UltraBio™ (PBSTx). Certifique-se de que a membrana fica completamente coberta pelo tampão de bloqueio. Incubar durante 10 minutos com agitação num agitador horizontal. O tempo de incubação pode ser de 5 a 15 minutos. Geralmente, 10 minutos de bloqueio podem obter melhores resultados de bloqueio do que 1 hora de bloqueio com BSA.d. A membrana bloqueada pode ser utilizada para procedimentos subsequentes, como a incubação de anticorpos primários. Para obter procedimentos detalhados de Western Blot, visite o nosso sítio Web em http://www.aladdin-e.com/support/western.htm.2. Procedimento para bloqueio em IF, IHC ou outras experiênciasNos procedimentos experimentais relacionados, basta substituir a solução de bloqueio tradicional por UltraBio™ Blocking Buffer (PBSTx) e reduzir a duração do bloqueio para 10 minutos. Testámos vários anticorpos primários e verificámos que foram obtidos resultados de bloqueio semelhantes quando o tempo de bloqueio variou entre 10 e 20 minutos. Os resultados do bloqueio durante 10 minutos com este produto foram iguais ou significativamente melhores do que os obtidos com os métodos de bloqueio convencionais.
