SgeI

Cat. No.: S750393

Storage

Armazenar a -20°C

Shipped In

Arca de gelo + almofadas de gelo

Visão geral

SgeI é uma endonuclease de restrição que pode clivar alvos de DNA contendo 5-metilcitosina em DNA de fita simples ou dupla. Reconhece o local m5CNNG(9/13) e apresenta uma eficiência de digestão óptima no seu tampão de reação único a 37℃. Para garantir um desempenho consistente, o tampão de armazenamento da enzima contém BSA, que aumenta a estabilidade da enzima e se liga a quaisquer contaminantes potenciais na preparação do DNA.Ensaio de atividade enzimática

Precauções：

A enzima de restrição deve ser mantida no gelo durante o uso e armazenada a -20 ℃ imediatamente após o uso.O SgeI requer pelo menos 2 locais de reconhecimento no DNA do substrato para uma clivagem eficiente.A digestão completa do DNA metilado por SgeI depende do número de locais de reconhecimento no DNA. Além disso, os produtos gerados a partir da clivagem específica podem promover a clivagem não específica por SgeI. Para água ultrapura sem nuclease, recomendamos a Pure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (, ST876).Se o local de digestão enzimática esperado não puder ser cortado, verifique se existe uma potencial interferência de metilação.Os isosquizómeros podem ter diferentes sensibilidades a diferentes metilações. Quando se verificam potenciais problemas de interferência de metilação, pode tentar-se utilizar um isoquimzómero diferente. Para sua segurança e saúde, por favor use uma bata de laboratório e luvas descartáveis durante a operação

Instruções de utilização：

1. Prepare a reação de digestão enzimática única em gelo da seguinte forma:ReagenteDNA de plasmídeoÁgua ultrapura até 20µlTampão 10X SgeⅠ2µlDNA de substratoxµl (até 0,5- 2µg)SgeI0,2-1µlVolume total20µlNota: O volume da reação pode ser aumentado ou diminuído proporcionalmente.a. Misture suavemente pipetando a mistura de reação para cima e para baixo, ou agitando o tubo de reação. Centrifugar brevemente para recolher o líquido no fundo do tubo.b. Incubar a 37℃ durante 1 hora, de preferência num banho de água, uma vez que a temperatura é geralmente mais estável. Não é recomendado exceder 1 hora para a incubação.c. (Opcional) Termine a reação por aquecimento a 80 ℃ por 20 minutos para inativar a enzima.2. Ao realizar a digestão enzimática dupla ou múltipla, os seguintes princípios podem ser referidos para a configuração da reação com base na reação de digestão de enzima única fornecida acima.a. Adicione 1μl de cada enzima de restrição na reação. O volume da reação pode ser aumentado proporcionalmente, se necessário.b. O volume total das enzimas de restrição adicionadas na reação não deve exceder 1/10 do volume total da reação.c. Se a temperatura óptima de trabalho das diferentes enzimas de restrição utilizadas for diferente, inicie a digestão com a enzima que tem uma temperatura óptima mais baixa e, em seguida, adicione outras enzimas para realizar a digestão a temperaturas mais elevadas.

Specifications

Estabilidade e armazenamento

Armazenado a -20 ℃ imediatamente após o uso.

Condições de armazenamento de armazenamento

Armazenar a -20°C

Enviado em

Arca de gelo + almofadas de gelo

Perguntas frequentes

How should this product be stored?

Store at ?20 °C. Freezer storage is required to maintain the specified shelf life.

How is this product shipped?

This product ships in an insulated container with ice pads. Unpack on arrival and transfer it to the storage condition stated above.

What documentation is provided?

Available product documentation, including Certificates of Analysis (COA), Safety Data Sheets (SDS), and specification sheets, is shown in the product document area. Document availability and access follow the current site policy.