2xEs Taq MasterMix - para PÁGINA, high purity

Cat. No.: E666027

GRADE & PURITY for PAGE

Descripción general

Contenido del producto：

E666027	Componente	5 ml	Almacenamiento
E666027A	2×Es Taq MasterMix (para PAGE)	5×1 mL	-20°C. Evitar el ciclo congelación/descongelación.
E666027B	ddH₂O	5×1 mL	-20°C. Evitar ciclo congelación/descongelación.

Notas: 2×Es Taq MasterMix contiene Es Taq ADN Polimerasa, 3 mM MgCl₂ y 400 µM de cada dNTP.

Introducción del producto:
Este producto es un sistema premezclado compuesto por EsTaq ADN Polimerasa, Mg2+, dNTPs, estabilizadores y potenciadores de PCR, con una concentración de 2 ×. La EsTaq ADN Polimerasa tiene un excelente rendimiento de alta eficiencia de amplificación y baja tasa de desajustes. La fórmula única de MasterMix hace que todo el sistema de reacción sea muy estable, con más del 98% de amplificación PCR exitosa a la vez. Al mismo tiempo, las plantillas complejas también pueden amplificarse eficazmente, y el error humano y la contaminación pueden minimizarse al máximo. Este producto no contiene colorantes. Una vez finalizado el programa de PCR, puede añadirse una cantidad adecuada de tampón de muestra según sea necesario para la operación de electroforesis. La mayoría de los productos PCR obtenidos de la amplificación tienen una base "A" unida al extremo 3 ', lo que los hace adecuados para su uso directo en la clonación T/A. Adecuados principalmente para reacciones de PCR convencionales y experimentos de clonación de genes que requieren alta fidelidad, los productos de amplificación de PCR se utilizan específicamente para la detección por electroforesis en gel de poliacrilamida.

Control de calidad:
Después de las pruebas, no había actividad exógena de nucleasas; Método PCR para detectar ADN residual sin huésped; Puede amplificar eficazmente genes de copia única de múltiples genomas.

Utilización:
El siguiente es un ejemplo de un sistema de reacción PCR y condiciones de reacción para amplificar un fragmento de 1 kb utilizando ADN genómico humano como plantilla. En la práctica, deben realizarse las mejoras y optimizaciones correspondientes en función de la plantilla, la estructura del cebador y el tamaño del fragmento objetivo.

1.sistema de reacción pcr

reactivo	50 μlSistema de reacción	concentración final
2×Es Taq MasterMix（para colorante）	25 μl	1×
Forward Primer，10 µM	2 μl	0.4 μM
Cebador inverso，10 µM	2 μl	0.4 μM
ADN molde	<0,5 μg	<0,5 μg/50 μl
ddH2O	hasta 50 μl

Atención: La concentración de cebadores debe estar comprendida entre 0,1 y 1,0, ya que la concentración final μ M sirve de referencia para establecer el intervalo. En caso de baja eficacia de amplificación, puede aumentarse la concentración de cebadores; Cuando se produzcan reacciones inespecíficas, puede reducirse la concentración de cebadores para optimizar el sistema de reacción.

2. Condiciones de la reacción PCR

paso	temperatura	tiempo	/
Pre desnaturalización	94℃	2 min	/
desnaturalización	94℃	30 s	25-35 ciclo
recocido	55-65℃	30 s	25-35 ciclo
extender	72℃	30 s	25-35 ciclo
Extensión final	72℃	2 min	/

Atención:
1) En experimentos generales, si la temperatura de recocido es 5 ℃ inferior a la temperatura de fusión Tm del cebador de amplificación, y no se puede lograr la eficiencia de amplificación ideal, la temperatura de recocido debe reducirse adecuadamente; Cuando se producen reacciones inespecíficas, aumente la temperatura de recocido para optimizar las condiciones de reacción.
2) El tiempo de extensión debe ajustarse en función del tamaño del fragmento amplificado, y la eficiencia de amplificación de la Es Taq ADN Polimerasa es de 2 kb/min.
3) El número de ciclos puede ajustarse en función de la aplicación posterior del producto de amplificación. Si el número de ciclos es demasiado pequeño, la cantidad de amplificación es insuficiente; Si hay demasiados ciclos, la probabilidad de desajustes aumentará, y los fondos no específicos serán graves. Así pues, al tiempo que se garantiza el rendimiento del producto, el número de ciclos debe reducirse al mínimo.

Almacenamiento y envío

Condiciones de almacenamiento de almacenamiento

Conservar a -20°C,Evitar la congelación y descongelación repetidas

Enviado en

Hielera + almohadillas de hielo