A Aladdin's Small RNA Ladder (10-50nt, 9 bandas) é constituída por nove oligonucleótidos de ARN de cadeia simples com comprimento entre 10 e 50nt. Tanto a extremidade 5' como a extremidade 3' de cada oligonucleótido são grupos hidroxilo, o que permite a sua utilização como marcador de tamanho de ARN pequeno durante a análise e deteção convencionais por eletroforese de ARN pequeno de cadeia simples.O tamanho destes nove oligonucleótidos de RNA na escada é distribuído uniformemente para facilitar a aproximação do tamanho do RNA pequeno. A escada é a escolha ideal para utilizar gel de poliacrilamida a 10%-20% contendo ureia (7M, 7,5M ou 8M) ou em gel de agarose a 3% para analisar moléculas de RNA pequeno entre 10-50nt. Pode obter-se um bom resultado de coloração com Na-red (um produto melhorado da EB, 2000X) (Figura 1). A banda de 30nt é mais brilhante, facilitando a diferenciação das bandas da escada. A escada é preparada em água DEPC contendo 50% de formamida desionizada. Este produto é suficiente para 50 cargas quando 2μl de escada são carregados por poço.Figura 1
Precauções：
A RNAase é onipresente nos arredores. Por favor, tome muito cuidado para evitar a contaminação por RNase durante o uso de Small RNA Ladder. Use sempre uma máscara durante a operação. Após a fusão, mantenha-o em gelo e faça alíquotas para evitar ciclos de congelação-descongelação. Este produto é recomendado para a aproximação do tamanho do ARN pequeno, não para a determinação exacta do tamanho, porque as moléculas de ARN pequeno podem conter algumas composições que afectam a sua mobilidade durante a eletroforese. Para sua segurança e saúde, por favor use uma bata de laboratório e luvas descartáveis durante a operação.
Instruções de utilização：
1. Preparar gel de ureia-PAGE com concentrações adequadas de poliacrilamida e ureia, ou gel de agarose a 3% para eletroforese. Recomendamos o Urea-PAGE Gel Preparation Kit (, R0218S) para a preparação de géis de ureia-PAGE.2. Para ureia-PAGE desnaturada, misture bem 2μl de escada e 2μl de 2X RNA Loading Buffer (, R0215), ferva a 95 ℃ por 1 minuto e coloque-o imediatamente no gelo. Carregue 4μl de mistura em um gel de ureia-PAGE para eletroforese.3. Para eletroforese em gel de agarose, misture 2μl de escada e 2μl de 2X RNA Loading Buffer (, R0215) bem, e carregue a mistura de 4μl em gel de agarose diretamente para eletroforese.4. Após a eletroforese, transferir o gel para um recipiente limpo de tamanho adequado, lavar o gel com água DEPC durante 1-2 minutos, corar o gel com 30 ml de solução de coloração de ácidos nucleicos durante 15 minutos à temperatura ambiente num agitador a 25 rpm, lavar com água DEPC 2-3 vezes (2-5 minutos de cada vez) e, em seguida, observar o resultado da coloração através de um sistema de imagem de gel. Recomendamos a utilização do NA-Red (produto melhorado EB, 2000X) para a coloração do gel de ARN e a utilização de água DEPC para a diluição.
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